sábado, 30 de noviembre de 2019

PRÁCTICA 8: DETERMINACIÓN CELULAR DE LOS GRUPOS SANGUÍNEOS ABO Y Rh EN TUBO

OBJETIVOS: 
- Determinar los grupos sanguíneos del sistema ABO.
- Determinar el Rh (Ag D).
- Observar la presencia de aglutinación en el tubo y el microscopio.

MATERIAL:
- Gradilla, parafilm, tubo de hemólisis y 6 tubos pequeños.
- Pipeta Pasteur y dispensador de suero fisiológico (SF).
- Micropipeta automática y puntas de plástico desechables.
- Centrífuga y visualizador.
- Portaobjetos, cubreobjetos y microscopio.


REACTIVOS: 
- SF.
- Anti-A
- Anti-B
- Anti-AB (actúa como control)
- Anti-D
- Autocontrol Rh


MUESTRA:
- Sangre anticoagulada

PROCEDIMIENTOS:
Procedimiento 1: LAVADO DE HEMATÍES
1. Poner en un tubo de hemólisis 0,5 ml de sangre-problema.
2. Llenar hasta arriba de SF y tapar con parafilm; agitar para que se mezcle bien la sangre con el SF.
3. Centrifugar durante 5 minutos a 2.500 rpm (revoluciones por minuto).
4. Extraer el sobrenadante con un pipeta Pasteur.
5. Repetir los 3 pasos anteriores 2 veces más.

Procedimiento 2: REALIZACIÓN DE UNA DILUCIÓN DE HEMATÍES AL 5%.
1. Del sedimento de hematíes obtenido del último lavado y centrifugación, coger con una micropipeta 0,1 ml de hematíes y depositarlos en un tubo pequeño.
2. Añadir 1,9 ml de SF.

Procedimiento 3: DETERMINACIÓN CELULAR DE GRUPOS SANGUÍNEOS ABO Y Rh
1. Rotular 5 tubos pequeños con A, B, AB, D, y CD.
2. Depositar en cada uno de ellos 3 o 4 gotas de la dilución de hematíes al 5%.
3. Añadir 3 o 4 gotas de suero anti-A, anti-B, anti-D, y autocontrol Rh en sus tubos correspondientes.
4. Agitar cada uno de los tubos para que se mezclen bien los reactivos con los hematíes.
5. Esperar 2 minutos para observar las reacciones de aglutinación resultantes.
6. Colocar cada uno de los tubos sobre el visualizador y observar la presencia o ausencia de aglutinación.



RESULTADOS:
Se observó aglutinación de los hematíes en el tubo anti-A y anti-D por lo que el grupo sanguíneo es A+ (Rh +)

ERRORES Y FALLOS:






PRÁCTICA 7: DETERMINACIÓN CELULAR DE LOS GRUPOS SANGUÍNEOS ABO Y Rh EN PORTAOBJETOS

OBJETIVOS:
- Determinar el grupo sanguíneo del sistema ABO.
- Determinar el grupo Rh (antígeno [Ag] D).
- Observar la presencia de aglutinación en portaobjetos.

MATERIAL:
- Portaobjetos (o tarjeta blanca), rotulador y pipeta Pasteur.
- Palillos mezcladores y visualizador de aglutinación.






REACTIVOS:
- Anti-A (A)
- Anti-B (B)
- Anti-AB (AB) (actúa como control)
- Anti-D (D)
- Autocontrol Rh (CD)


MUESTRA:
- Sangre anticoagulada

PROCEDIMIENTO:
1. Depositar una gota de cada uno de los sueros anti-A, anti-B, anti-D y control de Rh en sus correspondientes portaobjetos.
2. Situar una pequeña gota de sangre de la muestra- problema junto a cada una de las gotas de los reactivos anteriores.
3. Mezclar ambas gotas sobre el portaobjetos utilizando un palillo mezclador formando un círculo de 2 a 3 cm de diámetro.
4. Hacer oscilar el portaobjetos suavemente hacia adelante, hacia atrás y en círculo durante 2 minutos.
5. Observar la presencia o ausencia de aglutinación en el visualizador.



RESULTADOS:
Aparece presencia de aglutinación solo en anti-D, por lo que el grupo sanguíneo a determinar es 0+


OBSERVACIONES:
- Termostatizar los reactivos a temperatura ambiente durante unos minutos antes de su utilización.
- Esperar 2 minutos para comprobar las posibles reacciones débiles.
- Cambiar de palillo mezclador para cada reactivo.
- Expresar los resultados del sistema Rh con letras para no crear confusiones: Rh positivo (Rh+) <<POS>> y Rh negativo (Rh-) <<NEG>>

PRÁCTICA 22: REACTIVO SATURANTE-PRECIPITANTE DE CAPACIDAD DE FIJACIÓN TOTAL DEL HIERRO (CFTH)

OBJETIVO:   - Aprender a determinar la Capacidad Total de Fijación del Hierro (CTFH). - Determinar el porcentaje de saturación de la...