PRÁCTICA 22: REACTIVO SATURANTE-PRECIPITANTE DE CAPACIDAD DE FIJACIÓN TOTAL DEL HIERRO (CFTH)

OBJETIVO: 

- Aprender a determinar la Capacidad Total de Fijación del Hierro (CTFH).

- Determinar el porcentaje de saturación de la transferrina.

PRINCIPIO DEL MÉTODO:

La transferrina sérica se satura con un exceso de Fe3+ y el exceso no fijado se elimina por precipitación con carbonato magnésico, determinándose a continuación la cantidad total de hierro presente. La diferencia entre la capacidad de fijación total de hierro hallada (CFTH) y el hierro sérico inicial (Hb) nos da la capacidad de fijación de hierro no saturado o residual.

SIGNIFICADO CLÍNICO:
El hierro es el constituyente de un gran número de enzimas. La mioglobina, proteína muscular, contiene hierro, así como el hígado.

El hierro es necesario para la producción de hemoglobina, molécula que transporta el oxígeno en el interior de los glóbulos rojos.
Encontramos niveles altos de CFTH en la anemia ferropénica.
Niveles bajos en hemocromatosis, cirrosis, hepatitis aguda.
El hierro se controla, normalmente, junto con la capacidad de fijación total del hierro (CFTH), y nos indica la capacidad de unión sérica disponible.

El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

REACTIVOS: 

 REACTIVO ADICIONAL:

El sobrenadante obtenido se procesa como muestra para la determinación de hierro.

MATERIAL:

- Gradilla

- Seis tubos de ensayo 

- Pipeta automática de 100-1000 uL
- Puntas azules

- Centrífuga

- Espectrofotómetro

MUESTRAS:

- Plasma heparinizado

PROCEDIMIENTO:

1. Pipetear en los tubos:

2. Mezclar bien e incubar 10 minutos a Temperatura ambiente (15- 25ºC).

3. Añadir a cada tubo:

*Polvo: Medir usando la cuchara que se incluye (dosis aprox. 70 mg).

4. Mezclar bien e incubar 10 minutos a temperatura ambiente. 

5. Centrifugar 15 min. a 3000 r.p.m.

6. Recoger el sobrenadante, cuidadosamente y procesar como una muestra para la determinación de hierro.

7. Proceder de igual manera que en la práctica 21, utilizando el sobrenadante como muestra.

RESULTADO:

((A) Muestra - (A) Blanco de muestra - (A) Blanco de reactivo / (A) Patrón - (A) Blanco de reactivo) x 100 (Concentración Patrón)

(A) Patrón: 0,058

(A) Muestra: 0,107

((A) 0,107 / 0,058) x 100 = 184 μg/dL hierro

CFTH = Concentración de hierro en el sobrenadante x 3 (Factor de dilución)

CFTH = 184 x 3 = 552 μg/dL

Parte de la interpretación se encuentra en el último párrafo del fundamento de la práctica. Los valores de referencia de la CTFH son 200-400 μg/dl, por lo que el resultado obtenido está muy por encima de dichos valores. 
El rango de detección del método va desde los 3 μg/dl a los 1000 μg/dl. Como el resultado ha sido muy superior, y no entra dentro del rango, no es en absoluto fiable. Habría que proceder con una dilución, repitiendo las lecturas y multiplicando por la inversa del factor de la dilución realizada para obtener un resultado fiable.