Kit de reactivos citoquímicos para diagnóstico de la leucemia
El presente kit de “LEUCOGNOST® POX - Detección de la reacción de la peroxidasa en leucocitos” es utilizado para el diagnóstico celular en la medicina humana, se emplea en el examen hematológico y citológico de muestras de origen humano. Se trata de un kit de tinción que, junto con otros materiales de diagnóstico in vitro pertenecientes a nuestra cartera, hace evaluables determinadas para el diagnóstico estructuras de destino (mediante fijación, tinción, dado el caso contratinción, montaje) en material de examen hematológico y clínico-citológico, como p.ej. frotis de sangre total y de médula ósea.
El presente kit de tinción está previsto para la reacción en la cubeta de 60 ml de Hellendahl y contiene todos los reactivos necesarios para identificación de la actividad de la fosfatasa alcalina (ALPA) en leucocitos.El presente kit de “LEUCOGNOST® POX - Detección de la reacción de la peroxidasa en leucocitos” es utilizado para el diagnóstico celular en la medicina humana, se emplea en el examen hematológico y citológico de muestras de origen humano. Se trata de un kit de tinción que, junto con otros materiales de diagnóstico in vitro pertenecientes a nuestra cartera, hace evaluables determinadas para el diagnóstico estructuras de destino (mediante fijación, tinción, dado el caso contratinción, montaje) en material de examen hematológico y clínico-citológico, como p.ej. frotis de sangre total y de médula ósea.
PRINCIPIO:
Para la delimitación citoquímica de una leucemia mieloica crónica (CML) de otras enfermedades del tipo de formas mielo-proliferativas, especialmente frente a la mielofibrosis y la policitemia o, respectivamente, otros procesos inflamatorios o tumorosos, es adecuada la determinación de la actividad (índice) de la fosfatasa alcalina de leucocitaria.Además, el indice de la fosfatasa alcalina de leucocitaria representa un parámetro sencillo del transcurso en el caso de CML, que refleja diversas fases de actividad de la enfermedad hematológica.
La fosfatasa alcalina de leucocitaria cataliza la hidrólisis de ésteres fosfóricos en medio alcalino. El 1-naftol liberado a partir del fosfato de 1-naftilo se acopla con una sal de diazonio para dar un azocolorante pardo, que precipita en la célula de acuerdo con la localización y la actividad de la fosfatasa alcalina en la célula.
MATERIAL:
- Frotis frescos de sangre
- Alcohol 96º
- Papel
- Portaobjetos
- Lanceta
- Pipeta Pasteur
REACTIVOS:
Componentes del envase:
El kit de tinción contiene
- R1: Tris (hidroximetil)- aminometano
- R2: Fosfato de 1-naftilo sal sódico
- R3: Variamin sal azul B
1 cuchara dosificara
PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS:
Se necesitan frotis sanguíneos finos, secados al aires y guardados como máximo durante 3 días.
PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS:
Se necesitan frotis sanguíneos finos, secados al aires y guardados como máximo durante 3 días.
Los frotis han de ser secados al aire durante 30 minutos como mínimo, debiéndose fijar éstos antes de la reacción citoquímica propiamente dicha según las correspondientes prescripciones.
Después de la fijación los frotis podrán ser almacenados hasta 3 días en el frigorífico.
Todas las muestras deben tratarse de acuerdo con el estado de la tecnología. Todas las muestras deben estar rotuladas inequívocamente.
PREPARACIÓN DE REACTIVOS:
PREPARACIÓN DE REACTIVOS:
Preparación de solución de tinción
Utilizar solamente soluciones recién preparadas
La solución de tinción preparada es utilizable durante 90 minutos como máximo. La coloración propia de la solución reactiva es pardo rojiza y se enturbia rápidamente.
Tinción en la cubeta de 60 ml de Hellendahl
La turbidez no influye en la calidad de la tinción.
TÉCNICA:
Los portaobjetos han de ser inmersos y movidos brevemente en las soluciones, la simple introducción proporcionará resultados de tinción insuficientes.
Los portaobjetos deberían ser escurridos bien por goteo después de los diferentes pasos de tinción, de esta manera se podrá evitar el innecesario arrastre de soluciones.
Para el almacenamiento de preparados hematológicos durante varios meses se recomienda el montaje con un medio de montaje acuoso (p.ej. Aquatex®) y un cubreobjetos. Sin montaje, la tinción tendrá una estabilidad de unos 3 días; si se cubre con aceite de inmersión, la estabilidad será de sólo unas horas.
Para el análisis de preparados teñidos con un aumento microscópico >40x se recomienda el uso de aceite de inmersión.
RESULTADO:
Grado de intensidad 1: de uno a pocos gránulos.
Grado de intensidad 1: de uno a pocos gránulos.
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