OBJETIVO:
Realizar la determinación de la concentración de fibrinógeno funcional de una muestra problema mediante el método de Clauss.
PRINCIPIO DEL MÉTODO:
El Fibrinógeno, en presencia de un exceso de trombina, se transforma en Fibrina.
El tiempo de formación del coágulo es inversamente proporcional a la concentración de Fibrinógeno presente en la muestra de plasma.
SIGNIFICADO CLÍNICO:
El Fibrinógeno (Factor I), proteína sintetizada en el hígado, es un componente de la sangre utilizado para formar el coágulo. Su determinación nos ayuda a evaluar las alteraciones en los mecanismos de coagulación.
La concentración de fibrinógeno se incrementa en inflamaciones agudas y embarazo; por el contrario se observan valores bajos en terapias trombolíticas, enfermedades hepáticas, disfibrinogenia congénita, DIC (Coagulación intravascular diseminada) y pancreatitis1.
El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.
APARATAJE:
- Coagulómetro
MUESTRA:
- Plasma
REACTIVOS:
- R1: Trombina bovina
- R2: Tampón Imidazol, Ázida sódica
- R3: Solución Caolín
- Opcional: Coagulation cal, control normal, control pathologic
MATERIAL:
- Gradilla
- Tubos de ensayo
- Pipetas automáticas de 100-1000 uL / 20-200 uL
- Puntas de pipeta amarillas y azules
PROCEDIMIENTO:
El reactivo puede emplearse en técnica manual, mecánica, fotoóptica o con cualquier instrumento apto para detectar la formación del coágulo.
Imidazol: 50 uL muestra + 450 uL Tampón Imidazol.
La muestra diluida debe ser procesada antes de 1 hora.
2. Preparar las siguientes diluciones del Calibrador en Tampón Imidazol.
3. A 0,2 mL de cada dilución añadir 20 μL de R3 y atemperar a 37ºC durante 4-6 minutos.
4. Añadir 0,1 mL de reactivo R1 y cronometrar la formación de coágulos. No atemperar la trombina R1.
RESULTADO:
Control Normal: 024:0
Control Muestra: 023:2
Control Patológico: 050:3
Los valores son normales, están dentro del rango de la normalidad según protocolo.
Curva de calibración (extrapolar):
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