PRÁCTICA 14: TIEMPO DE SANGRÍA MEDIANTE TÉCNICA DE IVY

OBJETIVO:

Conocer el tiempo de sangría mediante la exploración de la fase vascular y plaquetaria de la hemostasia de uno mismo.

FUNDAMENTO:

Es el periodo de tiempo desde que se realiza una pequeña incisión en la piel y el momento en que finaliza el sangrado. Es la única prueba que permite medir in vivo la reacción plaqueta-endotelio y demuestra la capacidad hemostática de las plaquetas. Se usa la técnica de Ivy que consiste en practicar una incisión en la cara anterior de antebrazo mediante una hoja especial de 1 cm de longitud y 1 mm de profundidad.

El tiempo de hemorragia normal es entre 3 minutos y 30 segundos, y 8 minutos y 30 segundos. Las causas de prolongación del tiempo de sangría son las alteraciones en la pared vascular, trombocitopenias, defectos en la agregación o adhesión plaquetar. También lo realizaremos en el lóbulo de la oreja (parte inferior).

MATERIAL:

- Lanceta 

- Esfigmomanómetro

- Alcohol 70º

- Papel de filtro

- Portaobjetos

- Cronómetro

PROCEDIMIENTO:

1. Desinfectar con alcohol de 70º la zona donde se realizará la punción (antebrazo y lóbulo).

2. Dejar secar la zona.

3. En el antebrazo: Con ayuda del esfigmomanómetro, este debe estar entre 40 mm aproximadamente, realizar la punción. 

En el lóbulo: Colocar el portaobjetos detrás y presionar con la lanceta.

4. Con un círculo de papel de filtro, usando el borde y de canto, tomar contacto con la gota para que el papel absorba, teniendo especial cuidado de no contactar directamente con la lesión.

5. Repetir el paso anterior cada 30 seg, hasta que la sangre deje de manar. 

RESULTADO:
En el antebrazo: 2 min 30 seg.
En el lóbulo: 1 min 30 seg.
El valor es normal.

PRÁCTICA 13: DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DEL TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADA (APTT)

OBJETIVO:

Medir cuantitativamente el tiempo transcurrido de una muestra de plasma citratado, hasta la formación del coágulo. 

PRINCIPIO DEL MÉTODO:

Los factores intrínsecos de la coagulación se avivan en presencia de un complejo fosfolipídico y un activador soluble en plasma citratado; se mide el tiempo transcurrido después de la adición del cloruro clásico (CaCl2) hasta la formación del coágulo de fibrina.

SIGNIFICADO CLÍNICO:

La medida del tiempo de APTT, es la determinación más común junto con la PT, sirve para determinar trastornos de la coagulación y es particularmente sensible a los defectos de la coagulación intrínseca (Factores VIII, IX, XI, XII).

Se usa normalmente para la monitorización de las terapias anticoagulantes con heparina.

El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

MUESTRA:

- Plasma citratado

APARATEJE:

- Coagulómetro

- Baño termostático 

REACTIVOS:

- R1 Activador: Ácido elágico

- R2 Iniciador: Cloruro cálcico

- Opcional Control normal/patológico

MATERIALES:

- Pipeta automática de 100 uL

- Puntas de pipeta amarillas

- Gradilla

- Cubetas de coagulación

PROCEDIMIENTO:

1. Calentar a 37ºC los reactivos y la muestra.

2. Mezclar bien los reactivos sin agitarlos.

3. Colocar en una cubeta el imán.

4. Pipetear en la cubeta:

 - Plasma citratado: 100 uL

 - R1: 100 uL

5. Mezclar bien e incubar exactamente 5 minutos a 37ºC (tiempo de activación).

6. Luego pipetear en la cubeta:

 - R2: 100 uL

7. Mezclar.

8. Poner en marcha el cronómetro o el controlador de tiempo del coagulómetro y medir el tiempo de formación del coágulo, a partir de la adición del R2 Iniciador.

RESULTADO:

Rango: Debe estar entre los valores --> (62.0-71.3 seg)

Muestra: 65 seg