Día de realización de la práctica: 18/10/2019
OBJETIVOS:
Aprender a realizar, de forma correcta, la tinción de Wright.
FUNDAMENTO:
Los colorantes tipo Romanowsky están formados por Azul de Metileno y sus derivados oxidados, colorantes básicos, y el colorante ácido Rosina.
Los colorantes básicos se unen a los componentes ácidos de las células, ácidos nucleicos, gránulos en basófilos y proteínas ácidas que se tiñen de un color rojo púrpura más o menos intenso.
La Eosina se une a la hemoglobina, a los componentes básicos de las estructuras celulares y a los gránulos de los eosinófilos.
El balance entre el Azul de Metileno y sus derivados oxidados y entre estos y la Rosina, proporciona una tonalidad más o menos azul y una mayor o menor intensidad en la coloración, que son característicos de cada tipo de colorante Giemsa, May- Grünwald o Wright.
UTILIZACIÓN:
Para la tinción de células sanguíneas y de médula ósea.
MATERIALES:
- Frotis sanguíneo
- Cubeta para tinción
- Varillas paralelas
- Frasco lavador
- Pipeta Pasteur
- Cronómetro
REACTIVOS:
- Colorante de Wright
- Agua destilada
APARATOS Y EQUIPOS:
- Microscopio
PROCEDIMIENTO:
1. La extensión, secada al aire y sin fijar, se cubre totalmente con un volumen conocido de colorante (1 mL aproximadamente) que se deja actuar durante 5 minutos.
2. Posteriormente, se añade, gota a gota, igual volumen de agua tamponada (pH 6,8) soplando ligeramente con la pipeta para conseguir una mezcla homogénea.
3. Después de 5 minutos se vierte el colorante, se lava con agua tamponada (pH 6,8) y se deja secar al aire.
RESULTADOS:
10x
40x
100x
Neutrófilos, monocito
Neutrófilo
Eosinófilo
Basófilo
Neutrófilo
Eosinófilo
Neutrófilos
Neutrófilos y basófilo
Linfocito
Plaquetas y neutrófilos
OBSERVACIONES:
- Se hizo justo después de una tinción de May-Grünwald.
- La tinción de Wright obtuvo mejores resultados en general.
- Es bastante más rápida y sencilla que la tinción de May-Grünwald.
ERRORES Y FALLOS:
- Algunos microscopios no enfocaban del todo bien.
No hay comentarios:
Publicar un comentario