PRÁCTICA 10: CONFIRMACIÓN DEL GRUPO SANGUÍNEO A, B Y D, COMBINADO CON LA DETERMINACIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES

OBJETIVO:

- Identificar y confirmar el grupo sanguíneo ABO y RhD del receptor.

- Verificar la presencia de anticuerpos irregulares con la prueba de Antiglobulina indirecta.

APARATAJE:

- Incubadora

- Centrífuga

MATERIAL:

- Pipetas automáticas 10uL, 25uL, 50uL, 500uL

- Puntas de pipeta amarillas y azules

- Gradilla

- Pipetas Pasteur

- Tubo de ensayo 3 mL

REACTIVOS:

- Tarjeta ID-Card DiaClon Type+Screen

- ID DiaCell I

- ID DiaCell II

- ID DiaCell III

- ID Diluent 2

MUESTRAS:

- Sangre 0+

- Suero o plasma 

PROCEDIMIENTO:

1. Preparación de la muestra de sangre

- Preparar una suspensión de hematíes al 5% en el ID-Diluent 2 como sigue:

1. Pipetear 0,5 mL del ID-Diluent 2 en un tubo limpio.

2. Agregar 50 uL de sangre total y mezclar cuidadosamente.

2. Procedimiento de la prueba

1. Identificar la tarjeta ID-Card con el número o nombre de identificación del donante o del paciente.

2. Retirar la lámina de sellado sólo de los microtubos que se vayan a utilizar manteniendo la tarjeta ID-Card en posición vertical.

3. Pipetear 10 uL de la suspensión de hematíes del paciente en los primeros 3 microtubos (anti-A, anti-B, anti-D) de la tarjeta-ID.

4. Pipetar 50 uL de cada ID-DiaCell I-II-II en los microtubos 4, 5 y 6.

5. Agregar 25 uL de suero del paciente en los microtubos 4, 5 y 6.

6. Incubar la tarjeta ID-Card durante 15 minutos a 37ºC en la incubadora.

7. Centrifugar la tarjeta ID-Card durante 10 minutos en la centrífuga.

8. Leer y anotar las reacciones.

RESULTADOS:

- Positivo: Los hematíes aglutinados forman una línea roja sobre la superficie del gel o están repartidos en el gel.

- Negativo: Sedimento compacto de hematíes en el fondo del microtubo.

En los primeros 3 microtubos podemos observar que son - - +

En los microtubos 4, 5 y 6 son + + -