PRÁCTICA 9: DETERMINACIÓN DEL FENOTIPO Y GENOTIPO MÁS PROBABLE DEL GRUPO Rh

OBJETIVO:

Investigar el genotipo más probable del sistema Rh enfrentando los hematíes problema a distintos sueros que contienen anticuerpos dirigidos contra los antígenos que componen el sistema Rh.

FUNDAMENTOS:

El genotipo de una persona es su dotación genética en el cromosoma, y el fenotipo es la manifestación de ese genotipo. 

El fenotipo puede ser idéntico al genotipo.

Dado que no existe el antígeno d, ni el anticuerpo anti-d, es imposible determinar si el antígeno D es homozigoto o heterozigoto mediante su detección en los hematíes. Determinamos el genotipo más probable.

El interés en la determinación del genotipo se debe a que existen casos de madres inmunizadas frente a D, y conviene conocer si el padre es o no homozigoto para D, antes de producrise un nuevo embarazo. Un padre homozigoto D, transmitirá el gen D a todos sus hijos, mientras que uno heterozigoto lo transmitirá con un 50% de probabilidades.

El fenotipo se determina enfrentando los hematíes problema con los antisueros anti-D, anti-C, anti-E, anti-c y anti-e.

El genotipo más probable dependerá de la raza o el grupo étnico.

El genotipo del sistema Rh se enfrentan los hematíes problema a distintos antisueros dirigidos contra los antígenos que componen el sistema Rh. La existencia o no de estos antígeno en la superficie de los hematíes, se detecta por una reacción de aglutinación. Los resultados se trasladan a una tabla donde vemos los posibles genotipos:

MATERIAL:

- Material para el lavado de hematíes.

- Tubos para centrífuga, Pipetas Pasteur y papel parafilm.

- Gradilla y centrífuga.

- Cubreobjetos y portaobjetos.

REACTIVOS:

- Anti-D (D).

- Anti-E (E).

- Anti-C (C).

- Anti-e (e).

- Anti-c (c).

- Autocontrol D (CD).

- SF

MUESTRA:

-Suspensión de hematíes problema lavados al 5% en SF.

PROCEDIMIENTO:

1. Realizar el lavado de los hematíes de la muestra-problema y una dilución al 5% en SF.

2. Rotular los 6 tubos con las letras D, E, C, e, c y CD.

3. Depositar de 2 a 3 gotas del antisuero correspondiente y de 2 a 3 gotas de la suspensión de hematíes problema.

4. Tapar los tubos con papel parafilm y agitar suavemente.

5. Centrifugar a 1.000 rpm durante 1 minuto.

6. Resuspender el sedimento de hematíes dando pequeños golpecitos en el fondo del tubo.

7. Observar la presencia o ausencia de aglutinación en el visualizador, y si es necesario, en el microscopio.

RESULTADOS:
Un resultado positivo indica la presencia del antígeno del sistema Rh buscando en ese tubo.

Los cinco resultados obtenidos expresan el fenotipo de la sangre analizada y se comparan con los contenidos en la tabla de fenotipos y genotipos del sistema Rh.

La sangre analizada es Rh negativo, se puede determinar su único genotipo posible con respecto al sistema Rh. Sin embargo , si la sangre es Rh positiva, existen varios genotipos posibles que dan lugar al fenotipo previamente detectado.

El genotipo posible del sistema Rh en la sangre analizada es: dCe/dcEy dCE/dce